顯微鏡的放大率和分辨率之間的區(qū)別

　　了解熒光成像時(shí)要獲得良好結(jié)果時(shí)，了解放大倍率和分辨率之間的區(qū)別非常重要。當(dāng)談?wù)摲糯蟊稊?shù)時(shí)，我們指的是在顯微鏡下觀察物體時(shí)會(huì)出現(xiàn)多大的物體。相反，當(dāng)我們從實(shí)際意義上談?wù)摲直媛蕰r(shí)，我們指的是我們可以在圖像中區(qū)分多少細(xì)節(jié)，這可能是主觀的。從技術(shù)上講，分辨率受光的折射特性限制。

　　使用熒光可以提高分辨率

　　分辨率和放大率不一樣。在顯微鏡下，我們將放大圖像中可見(jiàn)的細(xì)節(jié)稱(chēng)為分辨率。如果您看不到放大后的樣本中的細(xì)節(jié)，則放大或使某些內(nèi)容看起來(lái)變大不會(huì)有什么好處。明視野顯微鏡依賴(lài)于由于樣品各個(gè)部分之間的密度差異而導(dǎo)致的光吸收差異，就我們的目的而言，這就是細(xì)胞。因此，當(dāng)您想在細(xì)胞中看到許多細(xì)節(jié)時(shí)，明場(chǎng)顯微鏡并不是很好。您如何提高分辨率？加入熒光團(tuán)以染色樣品中的結(jié)構(gòu)，并過(guò)濾以照亮樣品，聚焦樣品發(fā)出的光，添加靈敏的檢測(cè)器，現(xiàn)在您可以進(jìn)行熒光顯微鏡檢查了。

　　熒光成像使用的濾光片的不同類(lèi)型

　　通常情況下，濾光片組被設(shè)計(jì)成可用于捕獲熒光團(tuán)的更大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，但不會(huì)捕獲所有的熒光。多數(shù)現(xiàn)代化濾光片組的設(shè)計(jì)旨在確保激發(fā)濾光片只允許波長(zhǎng)區(qū)間的光線通過(guò)。這種類(lèi)型的濾光片稱(chēng)為帶通濾光片（band-pass filter）。帶通濾光片通常通過(guò)中間波長(zhǎng)和區(qū)間寬度確定。在較為簡(jiǎn)單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線離開(kāi)激發(fā)濾光片，即會(huì)照射到靶標(biāo)上，靶標(biāo)上的熒光基團(tuán)隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對(duì)于激發(fā)光線）遷移的光線。并非所有此類(lèi)發(fā)射光線都會(huì)被檢測(cè)器捕獲到——僅那些允許通過(guò)二向分色鏡且能通過(guò)發(fā)射濾光片的光線。發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或長(zhǎng)通濾光片，具體取決于特定的熒光團(tuán)和成像實(shí)驗(yàn)。如果您希望讓超過(guò)特定波長(zhǎng)的光線通過(guò)檢測(cè)器，可選擇長(zhǎng)通濾光片.